- 品名: 白鯊Biosharp BL1031A DiI (細(xì)胞膜紅色熒光探針)
- 型號(hào): BL1031A
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
商品詳情:
產(chǎn)品簡介:
DiD,DiO,DiI和DiR染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細(xì)胞染色,這類染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,最佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯:DiI(紅色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(遠(yuǎn)紅外熒光)和 DiR (深紅色熒光),這使得他們可以用來對活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。
DiI在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光,DiI和磷酯雙層膜結(jié)合后,最大激發(fā)波長為549nm,最大發(fā)射波長為565nm。 DiI 被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑。還被用于檢測細(xì)胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
產(chǎn)品信息:
CAS:41085-99-8
英文名:1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
使用方法(僅供參考):
一、DiI細(xì)胞膜染色液制備
1.配置DMSO或EtOH 儲(chǔ)存液:用DMSO或EtOH配置濃度1-2 mM的儲(chǔ)存液。
注:未使用的儲(chǔ)存液分裝儲(chǔ)存在-20℃,避免反復(fù)凍融,穩(wěn)定保存6個(gè)月;發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。
2.工作液制備:用合適的緩沖液(如無血清培養(yǎng)基,HBSS或PBS)稀釋儲(chǔ)存液,配制濃度為1-5 μM的工作液。
注:工作液的最終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來配制,可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。
二、細(xì)胞染色
a. 對于懸浮細(xì)胞
1.懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。
2.在37℃培養(yǎng)細(xì)胞5~20分鐘,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。
3.1000-1500rpm離心5分鐘。
4.去除上清,再次緩慢加入37℃預(yù)溫的培養(yǎng)液。
5.重復(fù)步驟3和4,兩次以上。
b. 對于貼壁細(xì)胞
1.吸去多余的培養(yǎng)液。
2.加入染料工作液,輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。
3.在37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 5~20分鐘,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。
4.吸去染料工作液,用培養(yǎng)液清洗2~3次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞,培養(yǎng)5~10分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。
三、結(jié)果分析
顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀檢測
注意事項(xiàng):
1、熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2、本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。
3、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:
-20℃干燥避光保存,有效期一年。