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產(chǎn)品目錄

白鯊Biosharp BL926A DiD (細(xì)胞膜遠(yuǎn)紅外熒光探針)

品名: 白鯊Biosharp BL926A DiD (細(xì)胞膜遠(yuǎn)紅外熒光探針)
型號(hào): BL926A
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

DiDDiO,DiIDiR染料是一族親脂性的熒光染料,可以用來(lái)染細(xì)胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當(dāng)與細(xì)胞膜結(jié)合后其熒光強(qiáng)度大大增強(qiáng),這類(lèi)染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對(duì)細(xì)胞染色,這類(lèi)染料在整個(gè)細(xì)胞膜上擴(kuò)散,最佳濃度時(shí)可以使整個(gè)細(xì)胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯:DiI色熒光),DiO(綠色熒光),DiD遠(yuǎn)熒光)和 DiR (深紅色熒光),這使得他們可以用來(lái)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。

DiDDiI的類(lèi)似物,但具有更長(zhǎng)的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng),為遠(yuǎn)紅外熒光,在一些細(xì)胞和組織染色中更有優(yōu)勢(shì),特別適合用于進(jìn)行多種熒光的同時(shí)染色。DiD可被633nm的氦-氖激光所激發(fā),DiD在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiD被激發(fā)后可以發(fā)出遠(yuǎn)紅外的熒光,最大激發(fā)波長(zhǎng)為644nm,最大發(fā)射波長(zhǎng)為663nm。

DiD被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長(zhǎng)期示蹤劑。用于檢測(cè)細(xì)胞的融合和粘附,檢測(cè)發(fā)育或移植過(guò)程中細(xì)胞遷移,通過(guò)FRAP檢測(cè)脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測(cè)細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。

DiD染色后可以兼容免疫熒光實(shí)驗(yàn)。建議使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黃皂苷配制的不會(huì)溶解細(xì)胞膜的通透液進(jìn)行通透,其它去垢劑配制的通透液可能會(huì)溶解細(xì)胞膜上的脂類(lèi)物質(zhì),造成DiD失去結(jié)合位置,最終導(dǎo)致DiD的染色失效。但通透也可能會(huì)影響DiD在細(xì)胞膜上的定位并會(huì)增加細(xì)胞內(nèi)的染色,具體實(shí)驗(yàn)中需根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求選擇合適的細(xì)胞通透液。

 

產(chǎn)品信息:

英文名:DiIC18(5); 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate

分子式:C61H99ClN2O4

分子量:959.91

純度:≥95%

 

使用方法僅供參考

一、DiD細(xì)胞膜染色液制備

1.配置DMSOEtOH 儲(chǔ)存液:用DMSOEtOH配置濃度1-5 mM的儲(chǔ)存液

2.工作液制備:用合適的緩沖液(如無(wú)血清培養(yǎng)基,HBSSPBS)稀釋儲(chǔ)存液,配制濃度為1-5 μM的工作液。

注:工作液的最終濃度是根據(jù)不同細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)來(lái)配制,可以從推薦濃度的十倍以上尋找最佳條件。  

二、細(xì)胞染色

a.對(duì)于懸浮細(xì)胞

1.懸浮細(xì)胞密度為1×106/mL加入到工作液中。

2.37℃培養(yǎng)細(xì)胞520分鐘,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。

3.1000-1500rpm離心5分鐘。

4.去除上清,再次緩慢加入37℃預(yù)溫的培養(yǎng)液。

5.重復(fù)步驟34,兩次以上。

b.對(duì)于貼壁細(xì)胞

1.去多余的培養(yǎng)液。

2.加入染料工作液,輕輕晃動(dòng)使染料均勻覆蓋所有細(xì)胞。

3.37 ℃培養(yǎng)細(xì)胞 520分鐘,不同的細(xì)胞最佳培養(yǎng)時(shí)間不同。

4.染料工作液,用培養(yǎng)液清洗23次,每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細(xì)胞,培養(yǎng)510分鐘,然后吸干培養(yǎng)基。

、結(jié)果分析

顯微鏡下觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)

 

注意事項(xiàng)

1、熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

2、本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品

3、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

保存條件:

-20℃干燥避光保存,有效期一年。



暫無(wú)內(nèi)容...