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產(chǎn)品目錄

TaKaRa pT7-IRES His-N DNA

品名: TaKaRa pT7-IRES His-N DNA
品牌: TaKaRa
型號(hào): 3290
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)

■ 制品內(nèi)容(Code No. 3281)
Cell Lysate*1100 μlMixture-1 60 μlMixture-2*210 μlMixture-3*220 μlT7 RNA Polymerase (200 U/μl) 10 μlpT7-IRES Vector (0.5 μg/μl)20 μlControl Vector*3 (0.3 μg/μl)5 μl

*1 現(xiàn)用現(xiàn)融解,使用微量移液器輕輕混合均勻并迅速使用,使用完畢立即置于-80℃保存。
注:雖然5次反復(fù)凍融基本不會(huì)造成產(chǎn)品性能下降,但建議小量分裝保存。
*2 Mixture-2和Mixture-3中均含有蛋白質(zhì),其中Mixture-2中含有HN標(biāo)簽蛋白質(zhì),因此應(yīng)避免劇烈攪拌或振蕩。
*3 該質(zhì)粒在pT7-IRES中插入了β-半乳糖苷酶基因。

■ 制品說(shuō)明
Human Cell-Free Protein Expression System是利用人源細(xì)胞提取物的無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)。本系統(tǒng)中的Cell Lysate包含了所有體外蛋白質(zhì)合成的必需因子(核糖體、翻譯起始/延伸因子和tRNA等)。只需將攜帶靶基因的pT7-IRES Vector、T7 RNA Polymerase、Mixture-3(氨基酸和ATP等)和Mixture-2(翻譯增強(qiáng)因子)加入到Cell Lysate中,就可以在一個(gè)反應(yīng)管中完成從RNA轉(zhuǎn)錄到蛋白質(zhì)合成的反應(yīng),操作十分簡(jiǎn)單。本制品具有反應(yīng)體系小、反應(yīng)速度快、可合成無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)的優(yōu)點(diǎn)。 pT7-IRES Vector轉(zhuǎn)錄得到的目的RNA含有IRES序列,這段序列能夠增強(qiáng)蛋白質(zhì)翻譯的起始。反應(yīng)液中添加了翻譯增強(qiáng)因子,在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中,它能夠活化Cell Lysate中無(wú)活性的翻譯起始因子,從而維持了穩(wěn)定的翻譯水平。本系統(tǒng)不僅提高了蛋白質(zhì)合成的效率,彌補(bǔ)了哺乳類無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)翻譯水平低的缺陷,而且能夠合成超過(guò)150 kDa的高分子量蛋白質(zhì)。 本系統(tǒng)適用于高通量的蛋白質(zhì)合成反應(yīng),只需一步即可完成。由于毒性蛋白會(huì)抑制宿主細(xì)胞生長(zhǎng)和功能,導(dǎo)致很難利用活細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來(lái)合成毒性蛋白質(zhì),所以本系統(tǒng)尤其適用于合成毒性蛋白質(zhì)。 * 3290/3291/3292與3281搭配使用,可表達(dá)帶有His標(biāo)簽或Myc標(biāo)簽的蛋白質(zhì)。 ■ 保存3281:-80℃;3290、3291、3292:-20℃。 
■ pT7-IRES Vector 的結(jié)構(gòu)

HumanCell-FreeProteinExpressionSystem品牌CodeNo.產(chǎn)品名稱包裝量Takara3281HumanCell-FreeProteinExpressionSystem10次Takara3290pT7-IRESHis-NDNA20μgTakara3291pT7-IRESHis-CDNA20μgTakara3292pT7-IRESMyc-NDNA20μg

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