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產(chǎn)品目錄

TaKaRa Chaperone Plasmid Set

品名: TaKaRa Chaperone Plasmid Set
品牌: TaKaRa
型號(hào): 3340P
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)
■ 制品內(nèi)容     Plasmid pG-KJE8 (10 ng/μl)100 μl     Plasmid pGro7 (10 ng/μl)100 μl     Plasmid pKJE7 (10 ng/μl)100 μl     Plasmid pG-Tf2 (10 ng/μl)100 μl     Plasmid pTf16 (10 ng/μl)100 μl  
【注意】本制品僅限用于科研目的,凡用于商業(yè)用途,須獲得Takara公司授權(quán)許可。了解詳細(xì)信息以及獲取相關(guān)許可文件,請(qǐng)致電4006518761或郵件聯(lián)絡(luò)service@takarabiomed.com.cn。


■ 貯存溶液      Tris-HCl (pH 8.0)10 mM     EDTA1 mM


■ 制品說(shuō)明
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能分析是后基因組學(xué)領(lǐng)域面臨的挑戰(zhàn)之一,現(xiàn)已受到廣泛關(guān)注。表達(dá)的大量重組蛋白質(zhì)需要對(duì)其結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行測(cè)定,為了滿足這一需求,便開(kāi)發(fā)了多種表達(dá)系統(tǒng)。大腸桿菌由于系統(tǒng)簡(jiǎn)單,在表達(dá)系統(tǒng)的選擇上范圍廣泛,因此通常被用作蛋白質(zhì)表達(dá)的宿主菌。但是,外源蛋白質(zhì)在E.coli中表達(dá)時(shí),常常出現(xiàn)表達(dá)的蛋白質(zhì)形成包涵體或被蛋白酶降解的情況,原因大多是表達(dá)的蛋白質(zhì)沒(méi)能進(jìn)行正確的折疊,這不利于研究蛋白質(zhì)功能。已證實(shí),分子伴侶 (Molecular Chaperones) 或稱(chēng)伴侶蛋白參與蛋白質(zhì)的折疊過(guò)程。為探究蛋白質(zhì)的體內(nèi)折疊機(jī)理,已投入了大量的研究工作。HSP Research Institute, Inc.在分子伴侶研究領(lǐng)域做出了顯著的貢獻(xiàn)。 本Chaperone Plasmid Set含有五種類(lèi)型的質(zhì)粒,每一種質(zhì)粒都能有效表達(dá)不同類(lèi)型的伴侶蛋白組,各伴侶蛋白組協(xié)同作用、共同參與蛋白質(zhì)折疊。據(jù)報(bào)道,目的蛋白質(zhì)與其中一種“Chaperone team”共同表達(dá),便可增加可溶性蛋白質(zhì)的回收率,而使用通常方法,由于包涵體的形成,這些表達(dá)蛋白質(zhì)常常是不可回收的 (參見(jiàn)圖1)。圖1. 伴侶蛋白對(duì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成體系的作用〈可使用大腸桿菌表達(dá)體系〉伴侶蛋白質(zhì)粒含有pACYC的復(fù)制起點(diǎn)和氯霉素抗性基因 (Cmr基因),通常應(yīng)用在大腸桿菌表達(dá)體系中,與ColE1型、具有氨芐抗性 (Ampr) 篩選標(biāo)記的表達(dá)載體共存。各伴侶蛋白質(zhì)基因位于araB啟動(dòng)子或Pzt-1 (tet) 啟動(dòng)子下游,而目的基因處于lac或其它啟動(dòng)子的控制之下,目的蛋白質(zhì)與伴侶蛋白可分別誘導(dǎo)表達(dá)。另外,質(zhì)粒上也具備啟動(dòng)子必要的元件 (araC或tetR)。需注意的是該伴侶蛋白質(zhì)粒不可以與含有氯霉素抗性基因的表達(dá)質(zhì)粒共同使用。例如,常用的pET系列載體等可以使用E.coli BL21 (DE3) 作為宿主,卻不可以使用E.coli BL21 (DE3) pLysS和E.coli BL21 (DE3) pLysE,因?yàn)樗鼈兎謩e包含了帶有Cmr基因、pACYC復(fù)制起點(diǎn)的pLysS或pLysE質(zhì)粒。此外,可以考慮使用的宿主還有E.coli JM109。 質(zhì)粒伴侶蛋白啟動(dòng)子誘導(dǎo)物抗性標(biāo)記 pG-KJE8  dnaK-dnaJ-grpEaraB L-ArabinoseCm  groES-groELPzt-1 Tetracyclin pGro7  groES-groELaraB L-ArabinoseCm pKJE7  dnaK-dnaJ-grpEaraB L-ArabinoseCm pG-Tf2  groES-groEL-tigPzt-1 TetracyclinCm pTf16  tigaraB L-ArabinoseCm表1:各質(zhì)粒編碼的伴侶蛋白質(zhì)種類(lèi)及誘導(dǎo)物 ■ 保存-20℃。 ■ Chaperone Plasmid載體圖譜    
ChaperonePlasmidSet
品牌CodeNo.產(chǎn)品名稱(chēng)包裝量
Takara3340ChaperonePlasmidSet1Kit


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