■ 制品內(nèi)容 |
Lysis Buffer for Microorganism to Direct PCR1 ml × 5支 |
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■ 制品說明 |
本制品是一種能夠快速裂解大部分細菌、真菌等微生物,使其釋放核酸,然后直接用于各種PCR檢測反應(yīng)的試劑。各種細菌、真菌等微生物已經(jīng)成為現(xiàn)階段分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的重要材料,但對于這些微生物的鑒定和篩選比較耗時費力,傳統(tǒng)的方法需要提取基因組DNA,然后再進行PCR檢測,這種方法得到的結(jié)果較為準確,但操作復(fù)雜,需要的菌體量大,且容易造成樣品間的相互污染。也有一些使用熱變性的方法對大腸桿菌等細菌直接進行檢測的方法,但其應(yīng)用范圍較小,對于大部分真菌以及細胞壁較厚的革蘭氏陽性細菌并不適用。本制品可以對革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、酵母菌、霉菌等大部分微生物進行裂解,釋放其基因組DNA,所得的裂解液可直接用于PCR反應(yīng),省去了提取基因組DNA的操作,節(jié)省時間,減少了樣品之間的污染,能夠達到微生物快速PCR檢測的目的。 |
■ 保存 |
室溫。 |
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■ 注意事項 |
1. 操作注意 |
① 本試劑具有一定的腐蝕性,使用時應(yīng)戴手套、眼鏡,避免液體濺到身體上,如不慎濺到皮膚上,應(yīng)立即用大量清水沖洗。 |
② 菌體的取量會影響實驗結(jié)果。平板上的菌落用牙簽或滅菌槍頭挑取即可,液體培養(yǎng)的菌絲應(yīng)取一毫米左右。 |
③ 裂解后,作為PCR反應(yīng)的模板加量不應(yīng)超出PCR反應(yīng)體系的1/10 (V/V)。 |
2. 本試劑在溫度較低時,溶液中可能會出現(xiàn)分層或絮狀沉淀,使用前請于37℃水浴中加熱并混勻。 |
3. 本制品為懸濁液,使用前應(yīng)充分混勻。 |
4. 本試劑保存一段時間后顏色會變淺,此為正常現(xiàn)象,不影響實驗結(jié)果。 |
5. 本試劑適用的微生物種屬請見附表。不在其中的微生物,本試劑不承諾可以有效裂解。 |
6. 裂解上清液適用于TaKaRa Ex Taq、TaKaRa LA Taq以及 Premix Taq (Ex Taq Version 2.0) 的反應(yīng)體系,其它PCR反應(yīng)體系未進行評價,不承諾一定能夠進行有效擴增。 |
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