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產(chǎn)品目錄

TaKaRa BcaBEST? RNA2步法反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增試劑盒

品名: TaKaRa BcaBEST? RNA2步法反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增試劑盒
品牌: TaKaRa
型號: RR023B
  • 產(chǎn)品詳情
  • 規(guī)格參數(shù)
  • 商品名稱:BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1

  • 商品編號:SPU2021050500

  • 上架時(shí)間:2022-01-06






■ 制品內(nèi)容 (Code No.: RR023A : 100次量*1
BcaBEST Polymerase (22 U/μl)50 μlRNase Inhibitor (40 U/μl)25 μlRandom 9 mers (50 μM)50 μlOligo dT Primer (50 μM)50 μlRNase Free dH2O1 mlBca-Optimized Taq (5 U/μl)25 μl2 × Bca lst Buffer1.25 ml × 2 支5 × Bca 2nd Buffer800 μldNTP Mixture (各10 mM)50 μlMgSO4 (25 mM)500 μlControl F-1 Primer*2 (20 μM)25 μlControl R-1 Primer*3 (20 μM)25 μlPositive Control RNA (2 × 105 copies/μl)25 μl  *1 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)10 μl,PCR反應(yīng)體系50 μl,可使用100次。*2 Positive Control RNA用上游引物。*3 Positive Control RNA用下游引物。

■ 制品說明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是一種體外擴(kuò)增DNA的簡單而有效的方法。雖然原理上PCR法是擴(kuò)增DNA,RNA不能直接被擴(kuò)增,但是經(jīng)過反轉(zhuǎn)錄酶的作用把RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA后,PCR法便可應(yīng)用于RNA的解析了。目前,此方法已廣泛應(yīng)用于RNA的構(gòu)造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表達(dá)解析等多種領(lǐng)域。本試劑盒含有從RNA反轉(zhuǎn)錄到cDNA以及擴(kuò)增此cDNA所必需的全部試劑,即用Bacillus caldotenax來源的BcaBEST Polymerase從RNA合成cDNA,然后在同一試管內(nèi)加入應(yīng)用LA PCR技術(shù)研制的Bca-Optimized Taq擴(kuò)增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的最適溫度是65℃,所以對具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的RNA特別適合。 
■ 各種引物的序列
引物名稱各引物序列Random 9 mers  5′-NNNNNNNNN-3′Oligo dT Primer  包含Takara特別設(shè)計(jì)的dT區(qū)域。本序列與TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,沒有M13 Primer M4區(qū)域。Control F-1 Primer  5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′Control R-1 Primer  5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′

■ 試劑盒的原理

BcaBEST RNA PCR的原理圖

■ 試劑盒特點(diǎn)
RNA模板  適用于所有RNA (對富含GC的mRNA及具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu)的mRNA特別有效)擴(kuò)增片段大小   5 kb以下反轉(zhuǎn)錄酶   BcaBEST Polymerase (最適溫度65℃)DNA聚合酶   Bca-Optimized TaqRNase Inhibitor   必須使用 (試劑盒中含有)合成cDNA第一條鏈的引物  Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或 特異性下游PCR Primer 可供選擇操 作   在同一反應(yīng)管中進(jìn)行 (反轉(zhuǎn)錄酶在進(jìn)行PCR反應(yīng)前須進(jìn)行高溫失活)


BcaBEST?RNAPCRKitVer.1.1
品牌CodeNo.產(chǎn)品名稱包裝量
TakaraRR023ABcaBEST?RNAPCRKitVer.1.1100次
TakaraRR023B(A×2)BcaBEST?RNAPCRKitVer.1.1200次


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